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 “完美新发明”GelBlue——安全凝胶电泳新时代 

UE细胞凋亡试剂盒系列

发布时间:2019/7/9 点击次数:1351 来源:US Everbright Inc.

<>  Annexin 系列

FITC/YF?488-Annexin V和PI凋亡试剂盒,通过标记凋亡早期细胞(绿色)和凋亡晚期/坏死细胞(红色),用于检测细胞凋亡水平。产品可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或者其他荧光检测设备进行检测。

1、产品优势

YF?488-Annexin V能够完美地替代FITC-Annexin V且具有以下独特优势:

※荧光亮度更高,荧光偶联物特异性好,荧光溢出效应减弱;

※良好光稳定性:克服了FITC易淬灭,易受自发荧光影响的缺点;

※几乎不受环境pH影响。

                          

    不同荧光基团在抗淬灭剂(90%甘油的PBS)里的荧光淬灭情况           YF488-Annexin V 荧光显微镜实验效果


      488-Annexin V细胞凋亡与T企业试剂盒对比检测                                 FITC-Annexin V细胞凋亡质检-抽检

             

结论:细胞分群差异在5%以内,无明显差异.


<> Caspase 3试剂盒

Caspase的活化是细胞凋亡的典型特征。一旦一个Caspase酶被激发,就会激活一系列其他的Caspase酶,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。

1、产品优势

实时检测完整细胞Caspase-3:检测活细胞个体内Caspase-3活性;

双功能:荧光底物实现活细胞Caspase-3活性检测并同时染色细胞核DNA;

简单和快速:直接加入细胞样品中,孵育15-30 min后即可检测,无需清洗残余染料;

多用途:兼容使用荧光滤光片的流式细胞仪和荧光显微镜;

可固定染色:兼容免疫荧光染色传统的固定和透化作用。

2、产品应用实例及比较

实例:荧光显微镜检测

结论:STS处理的HeLa细胞出现明显凋亡,SuperViewTM 488 Caspase-3 Substrate 孵育细胞后,可以清晰显示凋亡细胞。


<> JC-1线粒体膜电位检测试剂盒

当线粒体膜通透性发生改变时,膜电位会降低,线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件,它发生在细胞膜上的磷脂酰丝氨酸(PS)外翻与caspase水解酶激活之前。

1、用途

①细胞、纯化的线粒体膜电位检测

② JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期检测指标。

2、JC-1产品应用实例

线粒体膜电位较低时,JC-1以单体形式存在,产生绿色荧光;而线粒体膜电位较高时,JC-1以聚合物形式存在,产生红色荧光。图示:细胞经过药物不同时间点处理后,凋亡细胞逐渐增多,从原先的红光聚体,慢慢的释放为绿光单体。


<> TUNEL 凋亡检测试剂盒

在末端脱氧核糖核苷酸转移酶(TdT)的作用下,在基因组DNA断裂时暴露出的3-OH末端掺入绿色(YF?488-dUTP)或红色(YF?594-dUTP),从而可以用荧光显微镜或流式细胞仪检测。

1、特点

灵敏度高:能够在组织及细胞中检测到低水平的凋亡;

背景干扰小

应用广泛:死(固定细胞)、活细胞均可检测;

单个细胞检测:对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,准确的反映细胞凋亡最典型的生物化学和形态特征;

定量检测:可通过后续的流式、荧光显微镜对细胞凋亡进行定量。


2、用途:可用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡晚期过程中细胞核DNA的断裂情况。


<>细胞形态学以及周期检测

1、形态学检测

细胞形态的变化如胞膜褶皱或出泡、核染色质致密、胞质浓缩等,都可作为细胞凋亡的证据。一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。

           HeLa细胞凋亡过程中核染色质的形态学变化


DAPI, 对细胞膜有半通透性,可选择性的进入, 一般染固定细胞。


Hoechst 是膜透性的,因此在活细胞时候能轻松进入, 一般用来染活细胞;


2、周期检测

细胞周期(cell cycle)是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。 细胞周期可以分为间期(interphase)和有丝分裂期(M phase),细胞间期又常划分为休眠期(G0),DNA合成前期(G1),DNA合成期(S),DNA合成后期(G2),整个周期可表示为G1→S→G2→M。

荧光试剂应用实例参考

使用C6031 Cell Cycle and Apoptosis Kit试剂盒检测Jukart细胞周期情况(BL3通道检测)。左图为细胞群情况,右图为峰图,显示各周期细胞所占的比例情况:R3:G0/G1期细胞,占51.39%R4: G2/M期细胞,占22.764%R5S期细胞,占16.306%


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