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 “完美新发明”GelBlue——安全凝胶电泳新时代 

  • DiI(细胞膜橙红色荧光探针)

    产品货号: D4010

    产品规格: 10 mg

    目录价(元):400

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产品概述:

产品参数
外观:可溶于乙醇、DMF、DMSO 的深红色固体
λEx/λ Em(MeOH)= 549/565 nm
贮存条件:-20℃ 避光保存
保质期:有效期见外包装
CAS 号:41085-99-8
分子式:C59 H97 ClN2 O4
分子量:933.88

产品先容
DiI 即 DiIC18(3),全称为 1,1-dioctadecyl-3,3,3,3tetramethylindocarbocyanine perchlorate,是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。DiI 是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐染色整个细胞的细胞膜。DiI 在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。常与 DiA 一起用于细胞膜双色标记。
DiI 作为示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer),可以被 广泛用于正向或逆向,活的或固定的神经等细胞或组织。DiI 通常不会影响细胞的生存力(viability)。被 DiI 标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达 4 周,在体内可以长达一年。DiI 在被固定的神经元细胞膜上的迁移速率为 0.2-0.6 mm/day,在活的神经元细胞膜上的的迁移速率为 6 mm/day。
DiI 除了用于细胞膜荧光标记外,还可用于检测细胞的融合和粘附,发育或移植过程中细胞的迁移,通过 FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
DiI 染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定透化(室温下用 0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地进行质膜染色。


注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. DiO 染色固定的细胞或组织样品时,样品宜使用配制在PBS 中的 4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。


说明书:


    UE-D4010

常见问题解答:


细胞追踪有很多产品,该如何选择?
首先确定追踪细胞的时间,然后考虑染料结合机制。
1.钙黄绿素染料(C4041)标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳,但也会被某些类型细胞迅速外排。
2.亲脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能,并且能持续更长时间,但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外,它们还会在透化过程中丢失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于长期标记,其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。
4.CFDA SE(C4070)也能共价地结合于细胞组分。
在所有列出的试剂中,细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性(主动外排,膜和蛋白质的周转率等)。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间。

在细胞膜和细胞核双染实验中,细胞膜染色用DiI,细胞核染色用DAPI,细胞固定后,先染色DiI还是先染色DAPI?
先用DiI对细胞膜进行染色,后用DAPI染核。

DiI细胞膜染料,除了在549nm下有红光外,在488nm下有绿色吗?
该染料在488nm激发处,有微弱的激发,如果染料浓度太大或者曝光太强的话,会在488nm处有微弱的荧光,建议调整曝光和染料浓度。

DiI也可以染色细胞内的细胞器膜吗?
可以,因为DiI染色细胞膜是非特异性的,所以细胞器的膜也会被染上色,如果不想细胞器染色太明显,可以减少孵育时间或者将染料浓度降低。

引用及参考文献:


1.Overcoming the Reticuloendothelial System Barrier to Drug Delivery with a “Don’t-Eat-Us” Strategy
Yixuan Tang,Xiaoyou Wang,Jie Li,Yu Nie,Guojian Liao,Yang Yu,Chong Li
ACS NANO
应用方向:细胞膜染色  

引用文献
1.Optimizing conditions and avoiding pitfalls for prolonged axonal tracing with carbocyanine dyes in fixed rat spinal cords
应用方向:标记示踪

2.Iontophoretic dye labeling of embryonic cells
应用方向:细胞迁移

3.Dilation of the influenza hemagglutinin fusion pore revealed by the kinetics of individual cell-cell fusion events
应用方向:细胞融合

4.Alcohol inhibits cell-cell adhesion mediated by human L1
应用方向:细胞粘附

5.Analysis of simulated and experimental fluorescence recovery after photobleaching. Data for two diffusing components
应用方向:FRAP检测脂在细胞膜上的扩散

6.Standardization of a flow cytometric method for measurement of low-density lipoprotein receptor activity on blood mononuclear cells
应用方向:标记脂蛋白

7.Plasma Exosomes Spread and Cluster Around β-Amyloid Plaques in an Animal Model of Alzheimer’s Disease.
应用方向:DiI标记外泌体,注射入小鼠海马齿状回(DG)区,观察外泌体在皮质层的迁移


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