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SuperView? 488 Caspase-3 Substrate, 1 mM in DMSO
产品概述:
储存条件
-20 ?C避光干燥保存,有效期见外包装。
光谱特性
SuperView? 488:Abs/Em = 500/530 nm (with DNA)
产品先容
SuperView? 488 Caspase-3 Substrate 基于caspase-3/7
活力检测细胞凋亡提供了有效的工具,适用于荧光显微术和流式细胞术。
相比其他基于(FLICA)分析的caspase 的荧光底物或荧光抑制剂,SuperView? 488 Caspase-3 Substrate 检测
caspase-3/7 活性的同时不会抑制完整细胞的凋亡过程。
Substrate 由耦合caspase-3/7 DEVD 识别序列的荧光
DNA染料组成。Substrate 最初无荧光,穿过细胞膜进入细胞质。在凋亡细胞中,caspase-3/7 剪切Substrate,释放高亲和性的DNA染色,这种染料迁移到细胞核标记DNA并发出明亮的绿色荧光。因此,SuperView? 488 Caspase-3 Substrate 是双功能的,既可以检测caspase-3/7 活性,又可视化细胞核在细胞凋亡进行中的形态学变化。SuperView? 488 染色可以甲醛固定并兼容后续免疫染色实验。
SuperView? 488 Caspase-3 Substrate 提供 DMSO 和
PBS 两种溶解形式。PBS 形式可用于对 DMSO 毒性敏感的细胞,在对 DMSO 不敏感的细胞类型中,添加 DMSO 溶解形式可增强、SuperView? 488 的孵育染色效果。
注意事项
1.细胞可以用终浓度为1 μM 的Hoechst 33342 染料共同染色,使细胞核产生蓝色荧光染色(激发/发射:346/460 nm)。
2.SuperView? 488 染色可以被甲醛固定,但与甲醇固定不兼容。
3.甲醛固定的 SuperView? 488 染色细胞可以用 0.1%
Triton X-100 处理后进行后续染色,但这样处理后的染色的亮度可能会减弱。
常见问题解答:
该物质稳定性很好,用户反馈该产品37℃放置4-5 天,效果仍然很好
◆何时将SuperView? 488 Caspase-3Substrate 加入细胞中?
该物质实验前期、后期加入细胞均可,它不影响细胞凋亡进程,可实时监测caspase-3活性。
◆SuperView? 488 Caspase-3 Substrate适用于那种仪器检测?
该产品适用于能够激发并收集绿色荧光的仪器。
◆SuperView? 488 Caspase-3 Substrate可用于组织染色吗?
本企业未作SuperView? Substrates 活组织染色实验,有文献报道可用于胚胎组织或三维培养细胞,本产品不可用于固定细胞或组织。
◆SuperView? 488 Caspase-3 Substrate可用于随后的免疫染色吗?
可以,推荐使用2-4%的多聚甲醛室温固10-15 min,固定时间过长会导致信号下降,SuperView? 488 可以承受 0.1% 的Triton X-100 的通透性。不建议使用甲醇固定。
◆显微镜下SuperView? 488 Caspase-3Substrate 显色可维持多上时间?
荧光染料均存在荧光猝灭问题,该产品在荧光显微镜下保持稳定的时间与初始荧光强度、激发光源强度等因素有关。
◆为什么Ac-DEVD-CHO不能抑制SuperView? 进行细胞染色?
Ac-DEVD-CHO 是一种可逆的竞争性抑制剂,具有有限的细胞渗透性,可能不足以阻止高水平的caspase-3 活性。大家的实验表明,抑制剂的存在能够降低而不能消除整体的荧光强度,而不可逆抑制剂能够更有效地阻止caspase 活性。
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