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 “完美新发明”GelBlue——安全凝胶电泳新时代 

  • Super ECL Star(特超敏化学发光检测试剂盒)

    产品货号: S6010

    产品规格: 10 mL/100 mL

    目录价(元):198/1400

    可替代的同类产品:市面上各类ECL试剂盒

    大包装询价


产品概述:

储存条件
4℃密封避光保存,短期可放置于室温。有效期见外包装。

产品描述
Super ECL Star 最高灵敏度底物是一款具有超高灵敏度的增强型化学发光(ECL)底物,可通过辣根过氧化物酶(HRP)实现低飞克级(fg)的免疫印迹检测。
Super ECL Star特超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP 的抗体及其关联的抗原。由于采用了独特的发光底物系统,Super ECL Star 超敏发光液是目前最灵敏的商业化荧光 ECL 检测试剂。

注意事项
1. 步骤 1~4 可在日光灯下操作,但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。
2. 长时间曝光或蛋白过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系,曝光不足则条带模糊。
3. 发光工作液孵育约 3 min 后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见,低丰度蛋白条带发光较弱甚至肉眼不可见但可使 X 光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使 X 光胶片感光,因而弱带可曝光 1-10 h。如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 发光和曝光。
4. 由于特超敏发光液极其灵敏,强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗 1:5000~1:100,000,二抗 1:100,000~1:500,000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带,导致失败。
5. 某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。
6. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。
7. NaN 3 能抑制HRP 活性,回收第二抗体应避免使用NaN 3 ,如必需使用勿超过 0.01%。


说明书:


   UE-S6010

常见问题解答:


发光液用DAB显色好还是用ECL好?
1.一般DAB主要用于免疫组化显色,然后在显微镜下观察;ECL主要用于western blot,内含过物氧化酶作用底物,化学发光由暴光底片感光,并用于结果分析。
2.做western blot实验 ECL的敏感性比DAB染色要强的多。 

为什么目的条带信号弱?
1.优化一抗和二抗的工作浓度;
2.增加曝光时间,如必要可过夜曝光;
3.更换亲和力更高的抗体;
4.检查两种ECL试剂是否交叉污染。

为什么用ECL显色后背景很脏?
1.没有洗干净(使用PBST或者TBST);
2.一抗浓度过大,可以降低一抗浓度;
3.二抗浓度过大;
4.封闭时间短;
5.抗体稀释液效果不好。

ECL显色液显色后,为什么会出现空心现象?
可能是由于蛋白浓度过高或者二抗浓度过高导致底物消耗过快,出现空心情况,建议客户降低蛋白浓度或二抗浓度。

ECL显色液显色,刚开始曝出条带,隔几分钟后再次曝光无条带?
可能是由于一抗浓度太大,导致与二抗结合的HRP短时间内将ECL反应完,建议降低抗体浓度。

引用及参考文献:


1.Porcine epidemic diarrhea virus-induced epidermal growth factor receptor activation impairs the antiviral activity of type I interferon
Lijun Yang, Jiayu Xu, Longjun Guo, Taijie Guo, Lu Zhang, Li Feng ,Hongyan Chen, Yue Wang
journal of virology (2018) DOI: 10.1128/JVI.02095-17

2.
Integrin β1 promotes peripheral entry by rabies virus
Lei Shuai, Jinliang Wang, Dandan Zhao, Zhiyuan Wen, Jinying Ge, Xijun He, Xijun Wang, Zhigao Bu
Journal of virology 

3.Poly(ADP?ribosyl)ation enhances HuR oligomerization and contributes to pro?inflammatory gene mRNA stabilization
Yueshuang Ke, Xueping Lv, Xingyue Fu, Jing Zhang, Ameer Ali Bohio, Xianlu Zeng, Wenjing Hao, Ruoxi Wang, Istvan Boldogh & Xueqing Ba
Cellular and Molecular Life Sciences

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